A549细胞来源
A549细胞又称为肺癌人类肺泡基底上皮细胞，最早是在1972年由D.J.Giard等人通过一位58岁的白人男性的外植体肿瘤，转移并培养肺肿瘤组织而得到的。
在自然界中，这些细胞是鳞状的，它们可以通过肺泡扩散传播一些物质，如水和电解质。如果将A549细胞体外培养，它们会成长为单层细胞，附着或紧贴在培养瓶上。人肺泡上皮细胞株A549可以固定或悬挂在体外的溶液。
A549细胞培养体系
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英文名称 |
A549（STR鉴定正确） |
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中文名称 |
人非小细胞肺癌细胞（STR鉴定正确） |
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种属 |
人源 |
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组织来源 |
肺癌 |
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生长特性 |
贴壁生长 |
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细胞形态 |
上皮细胞样 |
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传代比例 |
1:3-1:4 |
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换液频率 |
2~3次/周 |
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倍增时间 |
22 h |
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培养体系 |
Ham's F-12K＋10% FBS＋1% P/S |
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培养条件 |
5% CO2 ；37℃ |
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冻存条件 |
冻存液：90%FBS+10%DMSO；液氮中长期保存。 |
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生物安全等级 |
1级 |
A549细胞特点
部分细胞传代后细胞内出现黑色小点，细胞间隙内出现少量颗粒物或者培养基中浮游着少量死细胞等均为正常现象，对细胞的增殖及试验无影响。
细胞消化或者复苏操作不当容易导致细胞死亡裂解产生大量碎片及颗粒，进而影响活细胞状态，注意消化或复苏过程尽量轻柔，严格控制消化时间和复苏操作规范，传代或复苏24h后建议观察细胞，建议换液一次去除死亡细胞；
A549细胞常见问题处理
Q: 培养过程中出前黑点问题如何处理？
A: 细胞内的黑色颗粒是细胞外分泌泡及细胞器折光，这个属于细胞自身特性，无法清除也无法改变，大部分细胞都会有这种现象，只是不同细胞颗粒多少有区别，细胞培养体系不适应、营养缺乏、渗透压异常等均可能导致细胞内颗粒增加，建议使用合适的培养条件。
细胞外的黑色颗粒大部分是细胞碎片和细胞代谢产物，可以先吸走培养基后用PBS润洗清除，再加新的培养基继续培养。润洗不能清除的可以换液清洗后等细胞密度70-80%左右消化处理细胞，消化完成后加完全培养基终止消化，混匀细胞，收集细胞悬液900-1000rpm(约150g)离心3min，弃上清。再加5ml PBS重悬细胞，再离心后，用完全培养基重悬接种到新的培养皿。第二次PBS重悬是为了去除碎片，如果平时碎片比较少，传代时可以省略PBS重悬的步骤；如果碎片很多，建议PBS多洗几次。
Q: A549细胞最佳消化时间建议多久
A： 每个客户用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样的，不能完全规定消化时间，以实际消化效果和客户经验为准。
Q: A549 细胞倍增时间多久？
A: 该细胞倍增时间较短，生长速度快，注意控制传代密度，建议1:3-1:4。