293细胞高效率转染试剂—锐赛生物“POLO 3000转染试剂”-分析方法-资讯-生物在线

293细胞高效率转染试剂—锐赛生物“POLO 3000转染试剂”

作者:上海锐赛生物技术有限公司 2011-12-22T00:00 (访问量:6000)

1 POLOdeliverer_ 3000转染试剂.pdf

 

产品简介:

POLOdeliverer™ 3000一种具有自主知识产权、独特配方的阳离子型转染试剂,具有转染效率高、低毒性和易于使用等优点,适用于常规哺乳动物细胞系的瞬时转染和稳定细胞系构建。POLOdeliverer™ 3000跟常规转染试剂相比具有如下优势:

1) 一步转染,转染前和转染后均不需要换液,操作简单;

2) 高转染效率,从而可以得到较高水平的蛋白表达;

3) 对细胞毒性低,对细胞生长无影响;

4) 对贴壁细胞和悬浮细胞的瞬时转染或稳定转染均有效;

5) 适用于微孔板转染,也适用于生物反应器的大量转染;

       6) 能高效转染很多细胞,如HEK293, CHO, COS-7, HeLa, HepG2, MDCK, PC12, HT29, NIH-3T3, MCF7, Vero, SF9等,尤其对293系列、HCT116效果更佳;

产品包装:

产品货号

产品规格

CT001-1

30ul

CT001-2

750ul

CT001-3

1.5 ml

贮藏条件:

建议2-8℃保存,无菌取用。2-8℃下可稳定保存半年,切忌反复冻融。

POLOdeliverer 3000转染质粒DNA或dsRNA的基本步骤

1) 转染前一天接种细胞到12孔板中,每孔接种1×105细胞于0.8ml完全培养基,在37℃,5% CO2条件下孵育过夜,使转染前细胞密度达到60%-80%

2) 2ug DNA2-20pmol dsRNA4ul POLOdeliverer™ 3000分别稀释到100ul DMEM中(RPMI1640opti-MEM亦可),混匀后室温放置5min

3) 将上述POLOdeliverer™ 3000溶液滴加到DNAdsRNA溶液中,轻轻混匀后室温下放置15min

4) 将上述混合物均匀滴加到培养基中,轻轻摇匀培养皿,转染前不需要换液。

5) 将转染的细胞在37℃,5%CO2条件下培养48-72h,转染后不需要换液,能满足细胞正常生长的营养即可。也可根据实验需要,在转染12-24h后换液。

6) 质粒DNA转染48-72小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或进行稳定细胞系的筛选。dsRNA转染6-24小时后收样检测。

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